Titlul proiectului: Targeting macrophages/ monocytes in the aged ischemic brain by pharmacological, genetic and cell-based tools
Contract de finanțare nr. 760058/ 23.05.2023
Perioada de implementare a proiectului: 01.07.2023 - 30.06.2026
Director de proiect: Prof. univ. dr. Dirk Hermann
Valoare totală proiect: 7.515.743,60 lei, din care: finanțare eligibilă nerambursabilă din PNRR: 7.000.000,00 lei; TVA aferentă cheltuielilor eligibile: 515.743,60 lei;
Descriere proiect:
Accidentul vascular cerebral ischemic este o cauză principală de invaliditate pe termen lung și deces. Tromboliza și trombectomia rămân singurele tratamente disponibile. În prezent, se fac eforturi deosebite pentru a îmbunătăți recuperarea după accidentul vascular cerebral prin terapii antiinflamatorii. În acest context, răspunsurile inflamatorii caracteristice asociate vârstei sunt în bună masură neglijate. Am arătat anterior că accidentul vascular cerebral ischemic se caracterizează prin infiltrarea masivă a creierului de către macrofage și monocite la subiecti bătrâni. Totuși, consecințele invadării creierului ischemic de către macrofage/monocite asupra recuperării după accidentul vascular cerebral sunt puțin înțelese. Utilizînd un model de ischemie cerebrală prin ocluzia arterei cerebrale medii (MCAO) la șoareci transgenici bătrani, ne propunem să caracterizăm rolul infiltratelor de macrofage/monocite asociate vârstei în degenerarea și remodelarea post-ischemică a tesutului nervos și recuperarea neurologică. Macrofagele și monocitele vor fi eliminate, dezactivate sau convertite genetic în fenotipul de tip M2, imunotolerant. Invazia intracerebrală și interacțiunea cu microglia și neuronii din periinfarct vor fi studiate prin microscopie cu doi fotoni (2P), iar răspunsurile macrofagelor/monocitelor vor fi caracterizate prin transcriptomică unicelulară. Vor fi studiate efectele neuroprotectoare ale (i) nanoveziculelor extracelulare (EVs) derivate din celulele stromale mezenchimale (MSC), (ii) rehabilitarii fizice, (iii) regimului nutritional și (iv) precondiționarii farmacologice, examinând modul în care macrofagele/monocitele modulează procesele de recuperare după accidentului vascular cerebral. Ipoteza de lucru este că macrofagele/monocitele contribuie la remodelarea rehabilitativă a creierului postischemic. Înțelegerea acestui rol ar trebui să ne permită să dezvoltăm terapii care să îmbunătățească evolutia post accident vascular cerebral la pacienții în vârstă.
Obiectivul general al proiectului:
Acest proiect analizează rolul macrofagelor/ monocitelor în creierul ischemic îmbătrânit. Pentru a atinge acest scop, vom studia răspunsurile macrofagelor/ monocitelor la nivel funcțional, celular și molecular, folosind o combinație de instrumente care implică studii comportamentale, histochemie, microscopie intravitală 2P, citometrie în flux și transcriptomică la nivel de celulă singulară. Folosind o varietate de intervenții terapeutice direcționate către macrofage/ monocite, vom elucida cum diferențierea macrofagelor/ monocitelor modulează leziunea ischemică și recuperarea după accident vascular cerebral. Ne propunem să identificăm noi ținte prin care recuperarea după un accident vascular cerebral poate fi îmbunătățită.
Obiectivele specifice ale proiectului:
- Examinarea invaziei, morfologiei și mobilității macrofagelor/ monocitelor în creier și interacțiunea cu celulele parenchimatoase cerebrale prin microscopie 2P,
- Studierea recrutării și activării macrofagelor/ monocitelor prin citometrie în flux și rtPCR,
- Caracterizarea diferențierii macrofagelor/ monocitelor prin transcriptomică la nivel de celulă singulară,
- Evaluarea efectelor epuizării sau dezactivării imunologice sau farmacologice a macrofagelor/ monocitelor asupra leziunilor ischemice și recuperării după accident vascular cerebral,
- Analiza efectelor transdiferențierii farmacologice sau genetice a macrofagelor/ monocitelor urmată de transferul adoptiv al celulelor asupra leziunilor ischemice și recuperării după accident vascular cerebral,
- Examinarea efectelor MSC-EV în combinație cu exerciții fizice, modificarea nutriției sau condiționarea macrofagelor/ monocitelor asupra leziunilor ischemice și recuperării după accident vascular cerebral.
